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一步到位!这款免提取、可定制、可冻干粪便直扩试剂你值得拥有

2023-06-21

近年来,随着分子生物学的发展和检测水平的提高,许多检测方法都可直接从临床粪便样本中进行靶标检测,其中qPCR检测已成为先进的胃肠病学常规诊断方法,一方面可用于常规病原体(细菌、病毒、寄生虫等)的检测,另一方面也可用于肿瘤筛查,对肿瘤相关原癌基因、抑癌基因表达水平进行实时检测,或对相关表观遗传学修饰如甲基化修饰等进行监测。


但粪便样本往往含有大量的高度复杂性和异质性的PCR抑制物,如酚类、代谢类化合物、胆盐、多糖和RNase等,均会对相关的扩增检测产生不利影响,该种样本特征需要扩增试剂具备有很强的抑制物耐受性。
为响应市场、客户对粪便样本快速、高效的检测需求,填补市场粪便直扩型扩增试剂的空缺,进一步简化粪便样本处理操作和缩短检测时间,宝锐针对粪便样本开发了RNA直扩型试剂,无需模板提取、样本纯化步骤,可直接用于多种病原体检测。
该直扩试剂具有抗抑制、高灵敏特征,适用于含粪便抑制物提取模板的高灵敏扩增和粪便样本的直扩检测。
威尼斯人可提供粪便直扩体系可冻干/预冻干试剂,全方位一站式解决粪便直扩检测的市场需求。





测试体系

2×Stool Direct RT Premix-UNG(Probe qRT-PCR)

测试程序

50℃ 15min;  95℃ 1min;  50cycles(95℃ 15s, 56℃ 45s)


0

1

测试:人总RNA扩增

模板:粪便样本背景的人总RNA


粪便样本处理:取0.2 g粪便样本加入1 mL TE Buffer中,充分混匀液化;瞬时离心后取上清,得到20%粪便样本,经无菌水稀释后得到0.5%和1%粪便样本;采用以上两种浓度的粪便样本稀释人总RNA模板,获得浓度为4.64 pg/μL的人基因组模板;然后按20%加样量直接加入反应体系进行扩增。




注:以上扩增图中,VIC和ROX通道扩增Ct值随粪便加样增加而增大,扩增Rn值随粪便加样增加降低。


结论:威尼斯人MD2124对粪便样本的耐受性比同类产品更强




0

2

测试:肠道病毒CA16检测

模板:粪便样本背景的CA16病毒核酸

粪便样本处理:取0.2 g粪便样本加入1 mL TE Buffer中,充分混匀液化;瞬时离心后取上清,得到20%粪便样本,经无菌水稀释后得到0.5%和1%粪便样本;采用以上两种浓度的粪便样本稀释CA16模板;然后按20%加样量直接加入反应体系进行扩增。


注:以上扩增图中,Supplier M的产品,随着粪便背景的提高,Ct值增大,Rn值下降,而Biori产品,靶标扩增不受粪便背景加量干扰,表现出更强的抗抑制性。


结论:威尼斯人MD2124对粪便样本的耐受性比同类产品更强




0

3

测试:粪便RT直扩可冻干体系加速稳定性测试(55℃加速30d)

模板:粪便样本背景的人总RNA

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左图1:粪便直扩体系冻干后形态

右图2:粪便直扩体系冻干后55℃加速30d形态


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结论:威尼斯人FMD5124,55℃30d加速稳定性检测合格




产品应用

Stool Direct RT Premix-UNG (Probe qRT-PCR)是专用于免除粪便样品的核酸提取纯化步骤,直接进行靶基因荧光定量(探针法)RNA扩增检测的专用试剂。本品有很强的抑制物耐受性,可简化粪便样本的检测流程,同时能够保持样本的质量和完整性。

如果您正在从事粪便样本中RNA病原体或病变物质的单重或多重检测,如果您有无创、便捷、快速的粪便核酸检测的需求,欢迎试用威尼斯人粪便直扩试剂Stool Direct RT Premix-UNG (Probe qRT-PCR)。


产品组分信息
产品名称:
Stool Direct RT Premix-UNG (Probe qRT-PCR) 
货号:MD2124
产品名称(可冻干)
Stool Direct RT Premix-UNG (Probe qRT-PCR) (DG) 

货号:FMD5124


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